Генная пушка

Генная пушка (

плазмидной ДНК. Данную технологию часто называют биобаллистикой и биолистикой (от англ.

При помощи генной пушки возможно модифицировать клетки любого типа, в том числе и растительные. При этом может происходить генетическая модификация как

ядра, так и органоидов, например, пластид

.

Устройство

Генная пушка была сконструирована как пневматический пистолет, стреляющий частицами

репортерными генами

, и модифицировали клетки лука. Экспрессия гена-репортера в тканях лука свидетельствовала об успешной трансформации.

Первая генная пушка была создана на основе гвоздезабивного пистолета. Каплю порошка вольфрама с генетическим материалом наносили на пулю и выстреливали в чашку Петри, перед которой помещали пластину с вырезом, останавливающим пулю. Пуля задерживалась металлической пластиной, а частицы вольфрама с генетическим материалом попадали на чашку Петри. Клетки в центре полностью разрушались частицами металла, но по периферии оставались целыми и в них происходила трансформация.

В настоящее время используют частицы золота и серебра, так как золото не является токсичным для клеток, в сравнении с вольфрамом.

Применение

Генные пушки в основном используют для трансфекции клеток растений. Применение для животных клеток также возможно.

Растения

Мишенью генных пушек часто является

хромосомы

растения.

Отобранные клетки со встройкой обрабатывают

гиббереллинами

), получают ткани, и даже целые растения.

Человек и животные

Генные пушки используют для доставки ДНК-вакцин.

Генные пушки используют для мечения клеток в культурах тканей. Введение плазмидной ДНК, кодирующие флюоресцентные белки, позволяют визуализировать клетки в культурах.^[1]

Для трансформации червя C. elegans, в качестве альтернативы микроинъекции также используют генные пушки.

Примечания

↑ Gan W, Grutzendler J, Wong WT, Wong ROL, Lichtman JW, Multicolor DiOlistic Labeling of the Nervous System Using Lipophilic Dye Combinations Neuron Volume 27, Issue 2, 219—225

Литература

John A O’Brien, Sarah C Lummis, Garth T. Whiteside, Ray W. Colburn and Michael H Hastings. Modifications to the hand-held gene gun: Improvements for in-vitro Biolistic transfection of neuronal tissue. J Neuroscience Methods 112:57-64 (2001).
Voiland, Michael; Linda McCandless.: . DEVELOPMENT OF THE "GENE GUN" AT CORNELL (неопр.).
Cornell University (February 1999). Дата обращения: 28 июня 2007. Архивировано
18 апреля 2000 года.

[1] Gan W, Grutzendler J, Wong WT, Wong ROL, Lichtman JW, Multicolor DiOlistic Labeling of the Nervous System Using Lipophilic Dye Combinations Neuron Volume 27, Issue 2, 219—225

[1]