Экзосома (комплекс)
Экзосо́ма (ко́мплекс), или PM/Scl-ко́мплекс —
Коровую (центральную) часть экзосомы составляет шестичленное кольцо, к которому прикрепляются другие
Несколько экзосомных белков являются мишенями
История открытия
Экзосома впервые была описана в 1997 году как РНКаза почкующихся дрожжей Saccharomyces cerevisiae[1]. Вскоре, в 1999 году, было установлено, что экзосома дрожжей эквивалентна уже описанным к тому моменту комплексам PM/Scl человека, которые несколькими годами ранее были изначально описаны как аутоантиген у пациентов с некоторыми аутоиммунными расстройствами[2]. Выделение таких человеческих PM/Scl-комплексов позволило идентифицировать другие экзосомные белки и, наконец, описать все компоненты комплекса[3][4]. В 2001 году увеличивающийся объём геномных данных позволил предсказать наличие экзосомных белков у архей, хотя первый экзосомный комплекс был выделен у архей лишь два года спустя[5][6].
Структура
Коровые белки
Коровая (центральная) часть комплекса имеет кольцевую структуру и состоит из 6 белков, каждый из которых принадлежит к одному и тому же классу РНКаз — белкам, подобным РНКазе РН[англ.][7]. У архей имеются два различных белка, подобных РНКазам РН — Rrp41 и Rrp42, каждый из которых трижды встречается в кольце и перемежается с белком другого вида. У эукариот кольцевая структура образована шестью различными белками[8][9]. Из шести эукариотических белков три белка напоминают белок Rrp41 архей, а три других — Rrp42[10].
Поверх этих кольцевых белков располагаются три белка, содержащих РНК-связывающие[англ.] домены S1[англ.]. У двух из трёх этих белков, кроме того, имеется К-гомологичный домен[англ.][7]. У эукариот все три этих S1-содержащих белка различны, а у архей они представлены белками одного или двух различных видов, хотя во всех случаях к кольцу прикрепляется только три субъединицы[11].
Кольцевая структура экзосомы очень схожа с таковой у РНКазы РН и .
Ассоциированные белки
Кроме вышеперечисленных девяти коровых белков, с экзосомами эукариот также часто ассоциированы два других белка. Один из них — Rrp44, гидролитическая РНКаза, которая принадлежит к семейству РНКазы R[англ.] гидролитических экзорибонуклеаз (использующих воду для разрыва связей между нуклеотидами). Кроме экзорибонуклеотической активности, Rrp44 также может функционировать как эндорибонуклеаза, эту активность проявляет отдельный домен этого белка[16][17]. У дрожжей Rrp44 ассоциирован со всеми экзосомными комплексами и необходим для их функционирования[18]. Хотя у человека имеется белок-гомолог Rrp44, долгое время не было доказательств того, что этот гомолог тоже ассоциирован с экзосомами[7]. Однако в 2010 году было установлено, что у человека существует три гомолога Rrp44 и два из них могут работать вместе с экзосомами. Наиболее вероятно, что эти два белка разрушают различные РНК-субстраты из-за различной локализации в клетке: один — Dis3L1 — локализован в цитоплазме, а другой — Dis3[англ.] — в ядре[19][20].
Другой белок, часто ассоциированный с экзосомой, — Rrp6 (у дрожжей) или PM/Scl-100 (у человека), как и Rrp44, этот белок является гидролитической экзорибонуклеазой, однако принадлежит к семейству РНКазы D[англ.][21]. Белок PM/Scl-100 наиболее часто встречается в экзосомных комплексах, локализованных в ядре, однако может входить в состав и цитоплазматических экзосом[22].
Регуляторные белки
Кроме двух вышеназванных белков, прочно связанных с экзосомным комплексом, многие белки взаимодействуют с экзосомами в цитоплазме и ядре клетки. Эти белки, слабо связывающиеся с экзосомами, могут регулировать активность и специфичность экзосомных комплексов. В цитоплазме экзосома взаимодействует с белками, связывающимися с AU-обогащёнными элементами, в том числе KRSP и TTP[англ.], которые стимулируют или предотвращают деградацию РНК. Ядерные экзосомы связываются с РНК-связывающими белками (в том числе MPP6/Mpp6 и C1D/Rrp47 у человека/дрожжей), которые необходимы для процессинга некоторых субстратов[7].
С экзосомами взаимодействуют не только одиночные белки, но и белковые комплексы. Один из них — цитоплазматический
Функции
Ферментативные функции
Как было показано выше, в экзосомный комплекс входит много белков с рибонуклеазными доменами. Конкретная природа этих доменов менялась в ходе эволюции от бактериальных комплексов до комплексов архей и эукариот, и различные ферментативные активности утрачивались или приобретались. Экзосома функционирует главным образом как 3′→5′-экзорибонуклеаза, то есть разрушает молекулы РНК начиная с их 3′-конца. Экзорибонуклеазы, входящие в состав экзосомы, могут быть или фосфоролитическими (как белки, подобные РНКазе РН), или, у эукариот, гидролитическими (белки, содержащие домены РНКазы R и D). Фосфоролитические ферменты используют неорганический фосфат для разрыва фосфодиэфирных связей и высвобождения нуклеотиддифосфатов. Гидролитические ферменты используют воду для гидролиза этих связей с высвобождением нуклеотидмонофосфатов.
У архей белок Rrp41 экзосомного комплекса является фосфоролитической экзорибонуклеазой. В кольце присутствуют три копии этого белка, они отвечают за активность комплекса[9]. У эукариот все субъединицы РНКазы РН утратили свою каталитическую активность, то есть коровое кольцо человеческой экзосомы не содержит ни одного активного фермента[25]. Несмотря на утрату каталитической активности, структура кора экзосомы высококонсервативна от архей до людей, подтверждая, что этот комплекс жизненно необходим для функционирования клетки. У эукариот потеря фосфоролитической активности компенсируется наличием гидролитических ферментов, которые у этих организмов обеспечивают рибонуклеазную активность экзосомы[26][25][27].
Как отмечалось выше, гидролитические белки Rrp6 и Rrp44 ассоциированы с экзосомами дрожжей и людей, кроме того, Rrp6 и два различных белка — Dis3 и Dis3L1 — могут связываться с экзосомой на месте дрожжевого белка Rrp44[19][20]. Хотя изначально считалось, что белки, содержащие S1-домен, проявляют 3′→5′-экзорибонуклеазную активность, существование этой активности у этих белков недавно было подвергнуто сомнению, и эти белки могут только играть роль в связывании субстрата с комплексом до деградации[26].
Субстраты
Экзосомы вовлечены в деградацию и процессинг многих РНК, в цитоплазме клетки они вовлечены в круговорот мРНК. Экзосомы могут разрушать мРНК, которые были помечены для деградации из-за содержащихся в них ошибок, через взаимодействие с белками, обеспечивающими
Хотя большинство клеток имеют и другие ферменты, разрушающие РНК с их 3′- или 5′-конца, экзосомы необходимы для выживания клетки. Если экспрессия экзосомных белков искусственно уменьшается или прекращается, например, путём РНК-интерференции, клетка останавливается в росте и вскоре умирает. Для работы экзосомы необходимы 9 коровых белков и 2 главных ассоциированных с экзосомами белка[33]. У бактерий нет экзосом, однако схожие функции у них выполняет более простой комплекс, содержащий белок RNPазу, — деградосома[34].
Экзосома является главным комплексом, обеспечивающим контроль качества клеточной РНК. В отличие от прокариот, эукариоты имеют высокоактивные системы, контролирующие клеточные РНК и распознающие непроцессированные или неправильно процессированные РНК-белковые комплексы (например,
Обнаружено, что в
Кроме участия в процессинге, кругообороте и контроле качества РНК, экзосомы играют важную роль в деградации так называемых криптических нестабильных транскриптов[англ.] (CUT), которые у дрожжей считываются с тысяч локусов[37][38]. Важность этих нестабильных РНК и их деградации остаются неизвестными, однако похожие РНК были выявлены и в человеческих клетках[39].
Клиническое значение
Аутоиммунные заболевания
Экзосомные комплексы оказываются мишенями антител у пациентов, страдающих от различных аутоиммунных заболеваний. Такие аутоантитела встречаются главным образом у людей, страдающих
При таких аутоиммунных заболеваниях
Хотя аутоантитела встречаются у пациентов, имеющих признаки нескольких различных аутоиммунных заболеваний, клинические проявления этих заболеваний варьируют очень широко. Наиболее часто наблюдаемые симптомы являются, как правило, типичными симптомами аутоиммунных заболеваний; к числу таких симптомов относят
Лечение рака
Показано, что работа экзосом подавляется
Неврологические расстройства
Мутации экзосомного компонента 3 вызывают врождённую болезнь мотонейронов спинного мозга, атрофию мозжечка, прогрессирующую микроцефалию и глубокую отсталость развития, что характерно для мостомозжечковой гипоплазии типа 1В[50].
Номенклатура субъединиц экзосомы
№ | Субъединица | Домен | Человека | Дрожжей | Археи | MW (kD)
|
Ген человека | Ген дрожжей |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | Csl4 | S1 RBD | hCsl4 | Csl4p/Ski4p | Csl4 | 21-32 | EXOSC1[англ.] | YNL232W |
2 | Rrp4 | S1/KH RBD | hRrp4 | Rrp4p | Rrp4 | 28-39 | EXOSC2[англ.] | YHR069C |
3 | Rrp40 | S1/KH RBD | hRrp40 | Rrp40p | (Rrp4)A | 27-32 | EXOSC3[англ.] | YOL142W |
4 | Rrp41 | РНКаза PH | hRrp41 | Rrp41p/Ski6p | Rrp41C | 26-28 | EXOSC4[англ.] | YGR195W |
5 | Rrp46 | РНКаза PH | hRrp46 | Rrp46p | (Rrp41)A,C | 25-28 | EXOSC5[англ.] | YGR095C |
6 | Mtr3 | РНКаза PH | hMtr3 | Mtr3p | (Rrp41)A,C | 24-37 | EXOSC6[англ.] | YGR158C |
7 | Rrp42 | РНКаза PH | hRrp42 | Rrp42p | Rrp42 | 29-32 | EXOSC7[англ.] | YDL111C |
8 | Rrp43 | РНКаза PH | OIP2 | Rrp43p | (Rrp42)A | 30-44 | EXOSC8[англ.] | YCR035C |
9 | Rrp45 | РНКаза PH | PM/Scl-75 | Rrp45p | (Rrp42)A | 34-49 | EXOSC9[англ.] | YDR280W |
10 | Rrp6 | РНКаза D | PM/Scl-100C | Rrp6pC | n/a | 84-100 | EXOSC10[англ.] | YOR001W |
11 | Rrp44 | РНКаза R | Dis3B,C | Rrp44p/Dis3pC | n/a | 105-113 | DIS3[англ.] | YOL021C |
- A У архей несколько белков экзосомы присутствуют во множестве копий (чтобы сформировать полную архитектуру комплекса экзосомы).
- B У человека в этой позиции комплекса могут находиться два разных белка: либо Dis3L1 (если экзосома находится в цитоплазме), либо Dis3 (если экзосома находится в ядре).
- C Участвует в рибонуклеазной активности комплекса.
Примечания
- ↑ 1 2 Mitchell P., Petfalski E., Shevchenko A., Mann M., Tollervey D. The exosome: a conserved eukaryotic RNA processing complex containing multiple 3'-->5' exoribonucleases. (англ.) // Cell. — 1997. — Vol. 91, no. 4. — P. 457—466. — PMID 9390555.
- ↑ Allmang C., Petfalski E., Podtelejnikov A., Mann M., Tollervey D., Mitchell P. The yeast exosome and human PM-Scl are related complexes of 3' --> 5' exonucleases. (англ.) // Genes & development. — 1999. — Vol. 13, no. 16. — P. 2148—2158. — PMID 10465791.
- ]
- ↑ Chen C. Y., Gherzi R., Ong S. E., Chan E. L., Raijmakers R., Pruijn G. J., Stoecklin G., Moroni C., Mann M., Karin M. AU binding proteins recruit the exosome to degrade ARE-containing mRNAs. (англ.) // Cell. — 2001. — Vol. 107, no. 4. — P. 451—464. — PMID 11719186.
- ]
- ]
- ↑ ]
- ]
- ↑ ]
- ↑ Raijmakers R., Egberts W. V., van Venrooij W. J., Pruijn G. J. Protein-protein interactions between human exosome components support the assembly of RNase PH-type subunits into a six-membered PNPase-like ring. (англ.) // Journal of molecular biology. — 2002. — Vol. 323, no. 4. — P. 653—663. — PMID 12419256.
- ]
- ]
- ]
- ↑ Symmons M. F., Jones G. H., Luisi B. F. A duplicated fold is the structural basis for polynucleotide phosphorylase catalytic activity, processivity, and regulation. (англ.) // Structure (London, England : 1993). — 2000. — Vol. 8, no. 11. — P. 1215—1226. — PMID 11080643.
- ]
- ]
- ]
- ]
- ↑ ]
- ↑ ]
- ↑ Mian I. S. Comparative sequence analysis of ribonucleases HII, III, II PH and D. (англ.) // Nucleic acids research. — 1997. — Vol. 25, no. 16. — P. 3187—3195. — PMID 9241229.
- ]
- ]
- ]
- ↑ ]
- ↑ ]
- ]
- ↑ Lejeune F., Li X., Maquat L. E. Nonsense-mediated mRNA decay in mammalian cells involves decapping, deadenylating, and exonucleolytic activities. (англ.) // Molecular cell. — 2003. — Vol. 12, no. 3. — P. 675—687. — PMID 14527413.
- ]
- ]
- ↑ ]
- ]
- ]
- ↑ Carpousis A. J. The Escherichia coli RNA degradosome: structure, function and relationship in other ribonucleolytic multienzyme complexes. (англ.) // Biochemical Society transactions. — 2002. — Vol. 30, no. 2. — P. 150—155. — PMID 12035760.
- ]
- ]
- ]
- ]
- ]
- ↑ Pope J. E. Scleroderma overlap syndromes. (англ.) // Current opinion in rheumatology. — 2002. — Vol. 14, no. 6. — P. 704—710. — PMID 12410095.
- ↑ Gelpi C., Algueró A., Angeles Martinez M., Vidal S., Juarez C., Rodriguez-Sanchez J. L. Identification of protein components reactive with anti-PM/Scl autoantibodies. (англ.) // Clinical and experimental immunology. — 1990. — Vol. 81, no. 1. — P. 59—64. — PMID 2199097.
- ↑ Targoff I. N., Reichlin M. Nucleolar localization of the PM-Scl antigen. (англ.) // Arthritis and rheumatism. — 1985. — Vol. 28, no. 2. — P. 226—230. — PMID 3918546.
- ]
- ↑ Brouwer R., Vree Egberts W. T., Hengstman G. J., Raijmakers R., van Engelen B. G., Seelig H. P., Renz M., Mierau R., Genth E., Pruijn G. J., van Venrooij W. J. Autoantibodies directed to novel components of the PM/Scl complex, the human exosome. (англ.) // Arthritis research. — 2002. — Vol. 4, no. 2. — P. 134—138. — PMID 11879549.
- ]
- ]
- ]
- ↑ Jablonska S., Blaszczyk M. Scleromyositis: a scleroderma/polymyositis overlap syndrome. (англ.) // Clinical rheumatology. — 1998. — Vol. 17, no. 6. — P. 465—467. — PMID 9890673.
- ↑ Lum P. Y., Armour C. D., Stepaniants S. B., Cavet G., Wolf M. K., Butler J. S., Hinshaw J. C., Garnier P., Prestwich G. D., Leonardson A., Garrett-Engele P., Rush C. M., Bard M., Schimmack G., Phillips J. W., Roberts C. J., Shoemaker D. D. Discovering modes of action for therapeutic compounds using a genome-wide screen of yeast heterozygotes. (англ.) // Cell. — 2004. — Vol. 116, no. 1. — P. 121—137. — PMID 14718172.
- ]
- ]
- ]
- ]
Литература
- Schilders G., Pruijn G. J. Biochemical studies of the mammalian exosome with intact cells. (англ.) // Methods in enzymology. — 2008. — Vol. 448. — P. 211—226. — ]
- Houseley J., Tollervey D. The nuclear RNA surveillance machinery: the link between ncRNAs and genome structure in budding yeast? (англ.) // Biochimica et biophysica acta. — 2008. — Vol. 1779, no. 4. — P. 239—246. — ]
- Vanacova S., Stefl R. The exosome and RNA quality control in the nucleus. (англ.) // EMBO reports. — 2007. — Vol. 8, no. 7. — P. 651—657. — ]
- Houseley J., LaCava J., Tollervey D. RNA-quality control by the exosome. (англ.) // Nature reviews. Molecular cell biology. — 2006. — Vol. 7, no. 7. — P. 529—539. — ]
- Büttner K., Wenig K., Hopfner K. P. The exosome: a macromolecular cage for controlled RNA degradation. (англ.) // Molecular microbiology. — 2006. — Vol. 61, no. 6. — P. 1372—1379. — ]
- Lorentzen E., Conti E. The exosome and the proteasome: nano-compartments for degradation. (англ.) // Cell. — 2006. — Vol. 125, no. 4. — P. 651—654. — ]
- Pruijn G. J. Doughnuts dealing with RNA. (англ.) // Nature structural & molecular biology. — 2005. — Vol. 12, no. 7. — P. 562—564. — ]
- Pereira P., Arraiano C. M. A precision RNA degradation machinery shapes stem cell development. (англ.) // The Journal Of Cell Biology. — 2019. — 19 July. — ]
- Fraga de Andrade I., Mehta C., Bresnick E. H. Post-transcriptional control of cellular differentiation by the RNA exosome complex. (англ.) // Nucleic Acids Research. — 2020. — 29 October. — ]
Ссылки
- Структура человеческой экзосомы в базе данных RCSB Protein Data Bank .
- Структура экзосомы архей в базе данных RCSB Protein Data Bank .
- Структура экзосомы архей, связанной с РНК, в базе данных RCSB Protein Data Bank .
- Структура дрожжевого экзосомного белка Rrp6 в базе данных RCSB Protein Data Bank .
- 3D-макромолекулярные структуры экзосом в базе данных EM Data Bank (EMDB) .
Эта статья входит в число хороших статей русскоязычного раздела Википедии. |